哪些化学因素会影响色谱柱的性能,做好防护才能用的更好[行业热点]
哪些化学因素会影响色谱柱的性能?色谱柱是我们实验室常用的一种产品,但是它很容易受到外界影响,所以我们要想要用好色谱柱,就要会排除色谱柱的干扰,那么哪些化学因素会影响色谱柱的性能?下面就给大家详细介绍一下。
影响色谱柱性能的化学因素
(1)键合类型及键合相
键合相分子与基体单点相连为单体键合,这种键合方式可以提高传质速率,缩短柱平衡时间,;聚合体键合为键合相分子与基体多点相连,这种键合方式可以增加色谱柱稳定性,增加载样量。而键合相不同会直接影响化合物的保留行为。
(2)碳覆盖率
高碳覆盖率可以提高分辨率和重现性,但分析时间长。
(3)封端
硅胶键合相填料中有部分未封端的残留硅羟基,如图封端可以减轻待测组分与硅胶表面残留的酸性硅羟基反应,改善保留和峰行,这对于碱性化合物尤其重要。而不同的封端技术也会直接影响色谱柱的效能。
建立新化合物分离分析方法的色谱柱选择
根据目标分析物的分子量大小、溶解性、Pka值,以及分离要求、仪器、成本等各方面来选择色谱柱。
(1)根据分离目的选色谱柱,对映体分离常选择手性柱,离子化色谱可选择离子柱,蛋白多肽、DNA可选择凝胶柱或离子交换柱,一般的小分子化合物可选择普通反相柱,如C18、C8柱、苯基柱等等。
(2)根据实际需求和设备选择填料粒径,普通HPLC一般选择5μm或3.5μm粒径的色谱柱,而UPLC则常使用1.7μm——3.5μm的色谱柱。
(3)比表面积,高比表面积有助于分离,低比表面积更适合梯度洗脱程序。
(4)孔径,大分子化合物适合大孔径,在保证比表面积的前提下,选择孔径大的。
以上就是色谱柱一些干扰因素,这类化学干扰我们平时很难注意到,所以要在了解之后才能做到排除化学干扰,这也是对于实验室工作人员的基本要求。如需继续了解色谱柱相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《色谱柱为什么不能直接用纯水冲洗,色谱柱维护保养做法[今日热点]》。
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