色谱柱老出问题怎么办,本文带你了解色谱柱常见问题[含解决方法]
色谱柱老出问题怎么办?色谱柱在实验中经常都会用到,但是同样的,很多人因为对于色谱柱了解不多,在使用色谱柱时就会导致色谱柱出现各种各样的问题,很多人遇到这种情况就不知道怎么办了,那么色谱柱老出问题怎么办?下面就给大家详细介绍一下。
色谱柱常见问题:
01
C18柱子如何调PH和温度以提高分离度呢?
答:通过调整pH和柱温优化分离度,这是方法开发中非常重要的手段。简单来讲,中性或不可电离化合物对pH变化不敏感。对于可电离化合物而言,可以通过调整流动相pH值,控制化合物电离状态来改变化合物的反相保留。降低pH可增大酸性化合物保留,而提高pH则可增加碱性化合物保留。通过调整pH改变化合物保留进而优化各个组分之间的分离度。
通常提高柱温使得传质加快,保留也会降低,但是不同化合物保留对温度变化敏感程度不同,因此也可以通过调整柱温改变各个组分的保留时间来优化分离度。
02
色谱柱总超压可能是什么原因呢?
答:超压一般是液相流路内部包括色谱柱在内可能有堵塞。需要先做分段排查确定堵塞的部位,再根据堵塞部位排查引起堵塞的可能原因。
如果是色谱柱堵塞,比较常见的原因有很多,如样品脏、基质复杂并且没有经过良好的预处理,或者预处理之后进入液相系统后又析出从而造成堵塞或污染(解决方法:加强样品预处理);色谱柱超压或超出pH范围使用导致填料碎裂,碎屑颗粒堵塞色谱柱(解决方法:根据测试条件选择合适色谱柱,避免超范围使用);仪器使用过程中部件磨损碎屑造成的堵塞(解决方法:及时更换受损部件)等等,都会引起系统色谱柱压力升高。
03
C18柱子出峰时间拖后是什么因素影响?用一段时间出峰时间就拖后了,请问与流动相有没有关系?
答:液相色谱中影响化合物保留的主要因素包括:样品,色谱柱,流动相(流速,组成,比例等),柱温等。使用过程中发现保留时间漂移的话,需要从以下几个影响因素进行排查:可以先通过对比保留时间漂移前后相同条件下的压力曲线是否重现,从而初步排查可能的原因。若压力曲线不重现,首先确认测试条件是否有改动,检查流动相流速,组成,比例等是否改变,是否存在漏液或进气泡引起的流速和比例变化;对流动相组成变化敏感的样品和方法,应确保每次配制流动相的重现性;检查色谱柱是否堵塞污染;仪器控温是否准确等等,可能的原因比较多,具体原因需要进一步排查。
04
色谱柱用什么流动相保存最好?用纯有机试剂是否容易干?
答:反相柱可以用HPLC级的甲醇或者乙腈保存,注意紧密连接堵头。正常情况下只要堵好堵头,溶剂是不容易干的。当然在保存溶剂中添加5%-10%的水,也没有问题。
以上就是色谱柱的常见问题,我们在使用色谱柱的过程中一定要留心,掌握了解决方法,就算出现了这些问题我们也不用慌张,着手解决就可以了。如需继续了解色谱柱相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《哪些化学因素会影响色谱柱的性能,做好防护才能用的更好[行业热点]》。
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