使用色谱柱常见的几个问题怎么解决,掌握方法才能用好色谱柱[含使用手册]
使用色谱柱常见的几个问题怎么解决?在我们实验室中色谱柱的使用一直是非常重要的,而色谱柱的使用需要一定的知识储备,如果对于色谱柱的使用不了解的话,就很容易出现各种问题,影响实验的进程,那么使用色谱柱常见的几个问题怎么解决?下面就给大家详细介绍一下。
色谱柱的使用容易遇到的问题及解决方法:
1、同一根色谱柱在分析完三聚氰胺后,再分析苯甲酸、山梨酸、糖精钠时为什么保留时间会提前?
答:色谱柱被强保留物质污染后,保留时间提前和滞后的情况都有,具体要看污染物的性质,还要看分析物、固定相和污染物三者共同作用的情况,情况比较复杂,有时候比较难预测是提前还是滞后。不过你平时维护的时候,注意在测定后将污染物用有机溶剂反冲清洗,就可以减轻或避免这种情况的出现。建议每个分析方法用专门的色谱柱,长远看,这样更节省色谱柱的费用。
2、多个样品不好不离的时候,请问该怎么通过选择合适的柱子来提高分离度?
答:提高分离度可从三个主要影响因素来考虑,柱效、选择性和保留因子。可通过减小填料粒径和增加柱长提高柱效;选择性和固定相选择以及pH条件有关,通过选择合适的色谱柱和合适的pH,可以提高选择性;有时候适当延长出峰时间增加保留因子,也可提高分离度。
3、普通的C18柱能作为正相色谱柱使用吗?正相色谱体系中最常用也最普通的是那种色谱柱。正相柱在使用过程中与反向柱相比有什么需要注意的地方?
答:普通C18柱作为正相柱使用,我还没听说过。正相色谱分离模式是指固定相的极性比流动相的极性大,反过来,流动相极性大就是反相。C18固定相属于疏水性相对比较强的,疏水性强就是极性很弱,应该找不出极性比它更弱的流动相了。
正相体系常见的柱子有:硅胶柱、氨基柱、CN基柱和Diol二醇基柱,最普通的应该就是硅胶柱。正相柱和反相柱比,最需要注意的是水分,正相柱对水分非常敏感,流动相中水分含量的些微变化对保留时间影响很大,因此正相柱测定前平衡时间需要几个小时甚至更长。
以上就是色谱柱使用过程中经常会出现的问题及解决的方法,我们需要解除色谱柱的使用的朋友要记好这些方法,这样才能保证实验的正常进行。如需继续了解色谱柱相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《色谱柱的构成及类型有哪些,色谱柱基础常识介绍[今日推荐]》。
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