使用液相色谱仪容易出现哪些问题,液相色谱仪常见问题分析[热点推荐]
使用液相色谱仪容易出现哪些问题?液相色谱仪是实验室中的精密仪器之一,既然是精密仪器,对于它的使用就需要格外小心,为了能够有效的使用液相色谱仪,我们要知道液相色谱仪容易出现哪些问题,那么使用液相色谱仪容易出现哪些问题?下面就给大家详细介绍一下。
液相色谱仪使用时常见问题如下:
使用后没有及时清洗泵
流动相不应含有任何腐蚀性物质,含有缓冲液的流动相不应保留在泵内,尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内,由于蒸发或泄漏,甚至只是由于溶液的静置,就可能析出盐的微细晶体,这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此,必须泵入纯水将泵充分清洗后,再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合硅胶固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。
没有流动相流出,又无压力指示怎么办?
可能是泵内有大量气体,这时可打开泄压阀,使泵在较大流量(如5ml/min)下运转,将气泡排尽,也可用一个50ml针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原因是密封环磨损,需更换。
压力和流量不稳了?
原因可能是气泡,需要排除;或者是单向阀内有异物,可卸下单向阀,浸入丙酮内超声清洗。有时可能是砂滤棒内有气泡,或被盐的微细晶粒或滋生的微生物部分堵塞,这时,可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡,或将砂滤棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)内迅速除去微生物,或将盐溶解,再立即清洗。
梯度洗脱的流动相选择不当
要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围后就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。
忽略的空白梯度洗脱
梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气,以防止混合时产生气泡。
忽略了溶剂混合所带来的粘度变化
混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小,当二者以相近比例混合时粘度增大很多,此时的柱压大约是甲醇或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力。
以上就是液相色谱仪使用时的注意事项,我们在只用种类仪器时一定要搞清楚这些仪器的注意事项,这样在使用时才不会出现意外,即使出现了,也能够自己解决。如需继续了解液相色谱仪相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《采购液相色谱仪需要注意什么,实验室仪器厂家教你选购方法[采购指南]》。
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