用不好液相色谱仪怎么办,掌握方法才是用好仪器的关键[使用指南]
用不好液相色谱仪怎么办?在我们操作实验室仪器时,经验在老道的师傅都会出现一些失误,更别说一些刚接触仪器不久的朋友,特别是液相色谱仪的操作,容易出现失误的地方很多,那么用不好液相色谱仪怎么办?下面就给大家详细介绍一下。
液相色谱仪容易出现失误的地方有以下一些:
流动相不过滤
因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Millipore滤膜(0.2μm或0.45μm)等滤器。泵的入口都应连接砂滤棒(或片)。输液泵的滤器应经常清洗或更换。
使用后没有及时清洗泵
流动相不应含有任何腐蚀性物质,含有缓冲液的流动相不应保留在泵内,尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如果将含缓冲液的流动相留在泵内,由于蒸发或泄漏,甚至只是由于溶液的静置,就可能析出盐的微细晶体,这些晶体将和上述固体微粒一样损坏密封环和柱塞等。因此,必须泵入纯水将泵充分清洗后,再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的溶剂(对于反相键合硅胶固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
流动相走空
泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完,否则空泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环,最终产生漏液。
没有流动相流出,又无压力指示怎么办?
可能是泵内有大量气体,这时可打开泄压阀,使泵在较大流量(如5ml/min)下运转,将气泡排尽,也可用一个50ml针筒在泵出口处帮助抽出气体。另一个可能原因是密封环磨损,需更换。
压力和流量不稳了?
原因可能是气泡,需要排除;或者是单向阀内有异物,可卸下单向阀,浸入丙酮内超声清洗。有时可能是砂滤棒内有气泡,或被盐的微细晶粒或滋生的微生物部分堵塞,这时,可卸下砂滤棒浸入流动相内超声除气泡,或将砂滤棒浸入稀酸(如4mol/L硝酸)内迅速除去微生物,或将盐溶解,再立即清洗。
以上就是液相色谱仪使用时经常出现失误的地方,我们在使用液相色谱仪的时候一定要留心这些点,只要我们细心一点,就不会出现这些失误。如需继续了解液相色谱仪相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《液相色谱仪使用要注意什么,记牢注意事项才能用好一起[操作须知]》。
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