液相色谱仪操作要注意什么，看完你就知道了[最新更新]

液相色谱仪操作要注意什么，液相色谱仪利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对复杂样品进行高效分离与分析。其操作不仅要求技术精湛，还需严格遵循操作规范，以确保实验结果的可靠性和仪器的稳定运行，今天天恒就带大家来了解液相色谱仪操作要注意什么。

一、流动相处理

流动相选择：流动相必须使用HPLC级试剂，以确保其纯度和稳定性。使用前需过滤以去除颗粒性杂质和其他物质，常用0.45μm或更细的滤膜进行过滤。

脱气处理：过滤后的流动相需进行超声波脱气，以去除溶解在其中的气体，避免气泡对实验结果的影响。脱气后应恢复至室温再使用。

避免纯乙腈作为流动相：纯乙腈作为流动相易导致单向阀粘住，影响泵的正常工作，因此应避免使用。

二、色谱柱维护

使用前准备：使用色谱柱前，应仔细阅读其附带的说明书，了解适用范围、pH值范围等关键信息。对于含盐流动相，使用后应先用水或低浓度甲醇水冲洗，再用甲醇彻底冲洗，以延长色谱柱的使用寿命。

轻拿轻放：色谱柱为精密仪器，使用过程中应轻拿轻放，避免剧烈震动或碰撞。

保存条件：长时间不使用色谱柱时，应将其取下并用堵头封好保存。避免使用纯水保存，因为纯水易导致长霉，应选用有机相（如甲醇）进行保存。

三、仪器开机与关机

开机操作：开机前，应检查各组件电源连接是否正确，确保Harb电源稳定。自上而下打开各组件电源，待BootpServer显示有信号后，再打开工作站进行后续操作。

冲洗系统：开机后，需用流动相冲洗系统一段时间，以确保系统稳定。对于含盐流动相，应先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相。

关机操作：实验结束后，应先关闭泵、检测器等组件，再关闭工作站和计算机。自下而上关闭色谱仪各组件电源，确保仪器安全关闭。

四、样品处理与进样

样品处理：样品应提前处理至适合液相色谱分析的状态，避免杂质对色谱柱和仪器的损害。对于易挥发性样品，应采取相应措施减少挥发。

进样操作：使用手动进样器进样时，进样前后均需用洗针液洗净进样针筒。洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒三遍以上，并排除针筒中的气泡。

避免污染：C18柱等特定色谱柱不能进蛋白样品、血样、生物样品等易污染物质，以免损坏色谱柱和影响实验结果。

五、清洗与保养

清洗管路：使用缓冲溶液后，应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，再用甲醇（或甲醇水溶液）冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，也需用去离子水冲洗。

定期检查：定期检查仪器各部件的连接情况，确保无漏液现象。若发现压力异常，应及时检查并排除故障。

记录与报告：使用者应认真履行仪器使用登记制度，记录每次实验的操作过程和结果。出现问题时，应及时向老师或专业人员报告，不得擅自拆卸仪器。

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液相色谱仪作为现代分析化学的重要工具，其操作涉及多个精密步骤和细节。通过遵循正确的操作流程和注意事项，可以有效提高实验结果的准确性和仪器的使用寿命。《实验室仪器中液相色谱仪色谱峰拖尾的原因是什么？一文带你了解【知识普及】》