液相色谱仪分离效果不好是什么引起的,要解决问题先找到问题[仪器解析]
液相色谱仪分离效果不好是什么引起的?在我们使用液相色谱仪的过程中,经常出现仪器效果不好的问题,特别是液相色谱仪分离效果不好还会直接影响实验进程,很多人都不知道其中的原因,那么液相色谱仪分离效果不好是什么引起的?下面就给大家详细介绍一下。
液相色谱仪分离效果不好可能是以下原因引起的:
1、流动相因素
流动相pH
不同基质的填料具有不同的pH适用范围。常温下无定形硅胶在纯水中的溶解度约为100mg·L-1,且在pH 1~9的范围内溶解的硅胶量几乎是常量,考虑到溶解速度的影响,对于硅胶基质的填料,其所能承受的流动相pH范围约为1~8。
流动相变质
当前使用最为广泛的是硅基键合相填料,当以水溶液作为流动相或流动相中含有一定浓度的磷酸盐缓冲液时,水溶液中或缓冲盐溶液中会滋生出一些细菌或霉菌,从而堵塞固定相颗粒间的空隙。特别是对于多元自动比例混合的高效液相色谱仪来说,水相或缓冲盐相独立存贮,因存放时间较长而容易发生此类问题。
流动相纯度
目前,广泛使用的填料颗粒粒径范围在3~10μm,孔径在6~10nm,色谱柱在使用中会有大量的流动相通过,如流动相含有微量不溶性杂质颗粒,则很容易在柱头部位被截留,久而久之,造成色谱柱机械性堵塞,引起柱压升高而无法正常使用。
2、样品因素
样品的溶解性
样品试样在配制中,如有少量微粒未能完全溶解,则会随试样一起进入色谱柱,同样,会沉积在柱头处,造成色谱柱的堵塞。
样品的纯度
样品中可能含有待分析组分以外的各种组分或杂质,这些组分或杂质可能会在柱内产生不可逆吸附,从而,使固定相的活性点被覆盖,保留特性发生变化。
样品的化学性质
待测试样中的各种组分与填料之间应具有化学稳定性,比较典型的是在使用氨基键合柱时,应避免使用含羰基的化合物和流动相,如,丙酮、乙酸乙酯等,以免固定相中的NH2和酐、酮发发希夫(Schiff)缩合而使固定相破坏。
以上就是导致液相色谱仪分离出现问题的主要原因,这对于我们液相色谱仪的正常使用影响是非常大的,如果仪器出现这些问题,我们要仔细检查,排除困难。如需继续了解液相色谱仪相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《液相色谱仪堵了是怎么造成的,这些要点都是影响的重要因素[原因分析]》。
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