液相色谱仪实验中如何操作,操作规范才能确保实验准确[使用说明]
液相色谱仪实验中如何操作?液相色谱仪属于实验室中的精密仪器,对于这类仪器,我们在使用时就需要特别注意它的操作规范,因为稍有不慎就会导致实验结果不准确,那么液相色谱仪实验中如何操作?下面就带大家一起来了解一下。
我们在实验中使用液相色谱仪时,需要注意以下这些:
1.流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。
5.长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如,甲醇等),因为,纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。
8.堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗,清洗方法:
①以异丙醇作溶剂冲洗;
②放在异丙醇中间用超声波清洗;
③用10%稀硝酸清洗;
9.气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
以上就是我们使用液相色谱仪时需要注意的一些注意事项,我们在实验中一定要多加注意,只有这样才能让实验顺利进行,养成良好的实验习惯是很重要的。如需继续了解液相色谱仪相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《液相色谱仪会被哪些因素干扰试验进程,排除干扰刻不容缓[解决方法]》。
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