液相色谱仪中的各种“体积”到底都是些什么?一文带你了解【知识普及】
液相色谱仪中的各种“体积”到底都是些什么?我们在接触液相色谱仪的时候,会经常听到“体积”,各种各样的体积字眼,大家也都看花了眼,这些到底是什么呢?接下来就和天恒仪器小编一起了解一下液相色谱仪中的各种“体积”到底都是些什么吧。
接下来,从这些体积的意义,或者对于液相分析的影响来看,它们主要可以分成两个大的部分,对于流动相的影响,以及对于样品的影响。
关键词:延迟体积
我们首先来看对于流动相的影响。
相信绝大多数使用液相的同学都是使用梯度方法,当然也使用泵来在线混合流动相的。我们也知道流动相的比例的改变会改变它的洗脱强度,从而改变样品的出峰时间和分离度。但是,流动相的比例的改变是需要到色谱柱上面才能对分离产生影响的。
这样从流动相混合点开始,到色谱柱的柱头这中间所有的体积,就叫做延迟体积(Delay Volume),因为流动相比例的变化因为这一段体积而被延迟了。
有时候,这个体积也被叫做梯度延迟体积(Gradient Delay Volume)、驻留体积(Dwell Volume),有时候这个Dwell Volume也被翻译成滞留体积,这个是容易让人产生混淆的地方,因为这里的滞留是指的流动相的滞留,稍后我们还会讲到样品的滞留。
关键词:空隙体积
接下来是体积对于样品的影响。
大家都知道,样品一旦进入了液相系统,被流动相带着往前运动的过程中,自身也会因为热力学运动产生扩散,所以在等度液相的条件下,越往后出的峰,峰宽一般都越宽。
一般来说,样品由自动进样器引入系统,可能经过了自动进样器内部的一些管路后,通过进样器到柱温箱的色谱柱。色谱柱的体积包括了填料的体积、以及填料间空隙的体积。
一般对于多孔硅胶填料的色谱柱来说,填料之间的体积占到了色谱整体体积的60%左右。我们一般把这部分叫做色谱柱的空体积/空隙体积(Column Void Volume)或者填料间体积(Interparticle Volume)。
关键词:滞留体积、死体积
在色谱柱中,样品也会在硅胶小球的空隙中持续地运动扩散。这种扩散会一直持续到检测器的流通池。整个这段样品扩散的体积就叫做液相色谱的滞留体积(Holdup Volume),或者是系统空体积/空隙体积(System Void Volume)。
请注意,这里是针对样品的滞留来说的,它包括了色谱柱内部填料空隙的体积(Interparticle Volume),以及从进样点到被检测到的所有的管路和接头的体积。后面这部分也别叫做柱外体积(Extra-Column Volume)或者死体积(Dead Volume)。
关键词:馏分收集的延迟体积
大多数时候,样品只要从检测器出来了,我们就不关心了它了,所以我们也不太去关心废液管的体积了。
但是只有一种情况例外,就是色谱分离检测到的样品,我还想要使用馏分收集器去把这些分开的化合物收集起来,去做进一步的分析。我们把这样的液相叫做制备液相。
馏分收集器都是跟检测器配合起来工作的,一旦检测器检测到有样品过来,就会告诉馏分收集器准备好去收集了。
但是它们之间是有一个时间差的,原因就是从检测器到馏分收集器之间的管路的体积。
这个体积,通常也被叫做延迟体积(Delay Volume),不过请注意这个是指的样品从检测器到馏分收集器的延迟,跟之前提到的流动相的混合的延迟完全不是一会儿事儿。
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综上所述,大家对液相色谱仪中的各种“体积”到底都是些什么,有了一个了解,选择一家有靠谱售后的实验室仪器厂家也能帮大家解决很多仪器上的小问题,以上就是今天的全部内容了,如需了解更多请阅读《实验室仪器中光谱仪如何选购?实验室仪器选购3大妙招》
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