液相色谱仪中流动相如何进行调配,做好这些事半功倍[实用知识]
液相色谱仪中流动相如何进行调配?液相色谱仪是我们实验中常用的一种仪器,在使用它时是需要一定的知识储备的,如果没有这些知识储备,在很多时候都会一筹莫展,特别是在调配流动相的时候,那么液相色谱仪中流动相如何进行调配?下面就给大家详细介绍一下。
流动相的配制与使用
1.恒度洗脱
一定是将水相与有机相混合后、抽滤(使用混合型过滤膜),用一个管路(如A管)泵入仪器,这是使用的原则。切勿因节约有机相、便于摸索色谱条件等原因而使用两个管路(一个纯水相、一个纯有机相)泵入仪器,即便配制了脱气机。因此种情形极易造成水相中盐和表面活性剂的少量析出。
剩余流动相完全可继续使用,密封后放置阴凉处;待下次试验时与新配制的流动相混合后抽滤即可。无需担心发霉、无机盐析出、挥发、比例不准等问题,这些皆为疑神疑鬼的表现。实践是检验真理的唯一标准!实践吧~
2.梯度洗脱
流动相配制最为科学的方式是:A相为高比例的水相-低比例的有机相、B相为低比例的水相-高比例的有机相(英国药典几乎均如此);其次为:A相为高比例的水相-低比例的有机相、B相为纯有机相;最不科学的为:A相为纯水相、B相为纯有机相,如既有质量标准采用了此种方式,建议改为第二种或第一种方式,否则基线漂移严重,难以进行稳定的杂质检测。
梯度洗脱结束后,建议经5分钟回到初始状态,再平衡5分钟后开始下一针测定。这10分钟的稳定极为关键。切勿短时间内回到初始状态,会对仪器和色谱柱损伤较大。
以上就是液相色谱仪流动相的调配,我们在使用时一定要掌握这些方法,这样才能在使用过程不会出现什么意外。如需继续了解液相色谱仪相关消息或者更多相关资讯,欢迎阅读《液相色谱仪分离效果不好是什么引起的,要解决问题先找到问题[仪器解析]》。
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