色谱柱损耗率高是什么原因?色谱柱在我们的实验时使用的非常多,有损耗是正常现象,但是如果损耗突然激增,很可能就是因为操作不当或者一起出现故障导致的,那么色谱柱损耗率高是什么原因?下面就给大家详细介绍一。
影响色谱柱损耗的因素有以下一些:
1、色谱柱安装方向
色谱柱安装应按照同一个方向连接使用,且需要按照色谱柱上的方向指示连接,尽量避免色谱柱反向连接!
常见色谱柱连接的问题主要有两种,安装色谱柱时管线伸出接头长度过长,使得螺纹拧入较浅,会导致密封性不好而漏液,进一步引起基线漂移或响应降低;反之,会在管线前段出现死体积,引起峰形展宽,灵敏度降低。
2、反相柱活化平衡
1)首先,使用甲醇或乙腈冲洗约20倍柱体积。
2)若流动相含有缓冲盐,使用与流动相中初始比例相等比例的超纯水和有机相冲洗过渡约20倍柱体积,再用含缓冲盐的流动相平衡冲洗约20倍柱体积或以上。
3)若流动相不含缓冲盐,可直接用流动相平衡色谱柱,大约20倍柱体积或以上。
4)当基线和压力平稳后测试,判断是否充分平衡以连续进样结果的重现为准。若不够可延长流动相的平衡时间。