液相色谱仪色谱柱的使用方法是什么?大家都知道,液相色谱仪中的色谱柱属于消耗品,如果不注意色谱柱的使用方法,随着使用的时间和次数的增加,液相色谱仪会出现色谱峰高降低、柱效下降的现象,所以不仅仅要注意仪器的保养,也要注意使用方法。那么液相色谱仪色谱柱的使用方法是什么呢?下面天恒仪器小编告诉大家。
反相柱
分别用甲醇:水=90:10、纯甲醇、二氯甲烷等溶剂着流动相,依次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积。然后再以相反的次序冲洗。
正相柱
分别用正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶剂做流动相,顺次冲洗,每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大,可降低流速,避免压力过高)。注意使用溶剂的次序不要颠倒,用甲醇冲洗完后,再以相反的次序冲洗至正己烷。所有的流动相必须严格脱水。
离子交换柱
长时间在缓冲溶液中使用和进样,将导致色谱柱离子交换能力下降,。用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生,反之,用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。
可以使保留时间相对恒定,对需要进行的定性鉴别可提高其可信度;保留时间的重复性是色谱分析进行定量的基础,这一点在色谱仪检定规程中有严格的要求。不同的保留时间不仅不能判断其成份的一致性,同时,由于保留时间不同峰面积也必将发生变化,其检测结果的可信度将受质疑。
温差较大时,因保留时间不稳将增加检测工作的复杂性。温度低的时候,因流动相黏度增加而使检测时间延长,同时增加泵的磨损,影响设备的使用寿命。如果温度过低也可能出现堵塞高压恒流泵、管路、进样阀、色谱柱的现象。其原因就是温度低溶解度相对下降而出现缓冲盐结晶。温度低时还因溶解度下降使杂质吸附在填料上而难于洗脱,从而影响色谱柱的使用寿命。